琼脂糖凝胶电泳

【目的及应用】： 扩增后样本电泳

【试剂及设备】： PowerPac 电泳仪，水平电泳槽，微波炉 琼脂糖，TBE 缓冲液，上样缓冲液，EB，样本

【实验步骤】： 1. 配置 1％琼脂糖凝胶：

称量琼脂糖 1g

0.5 X TBE 100ML

混匀，微波炉融化，温度降到 50℃左右，加入 10mg/mlEB（溴化乙锭）5μl，

EB 终浓度 0.05μg/ml.倒胶，凝固约 30min。

2. 电泳缓冲液：0.5 x TBE

10 x TBE 配置：

Tris 碱 108g

硼酸 55g

0.5mol/L EDTA,PH8.0 40ml

加水补齐到 1000ml

使用时稀释成 0.5 x TBE

3. 电泳： 取 6x DNA 上样缓冲液 1ul， PCR 产物 5ul， 混匀， 上样。

80V 电压， 电泳 60min。

4. 电泳完毕，在凝胶成像系统照相，分析。

【注意事项】

1. 在 EB 区操作，到其它区域更换手套

2. 微波炉使用完毕切记关闭电源